ការផលិត និងការកំណត់លក្ខណៈជីវគីមីនៃឡាក់កាសផ្សិតអយស្ទ័រ NRC 620 និងការវាយតម្លៃប្រសិទ្ធភាពរបស់វាក្នុងការធ្វើឱ្យទឹកផ្លែប៉ោមមានភាពច្បាស់លាស់។

បន្ទាប់ពីការភ្ញាស់ឋិតិវន្តរយៈពេល 25 ថ្ងៃនៅសីតុណ្ហភាព 28°C ឡាក់កាសពី *Pleurotus ostreatus* NRC620 បានបង្ហាញពីសកម្មភាពខ្ពស់បំផុតនៅក្នុងឧបករណ៍ផ្ទុកផ្សិត។ តម្លៃ pH និងសីតុណ្ហភាពល្អបំផុតសម្រាប់អង់ស៊ីមនេះគឺ 3.0 និង 70°C រៀងគ្នា។ បន្ទាប់ពីការភ្ញាស់រយៈពេល 2 ម៉ោងនៅសីតុណ្ហភាព 40°C និង 50°C សកម្មភាពអង់ស៊ីមនៅតែរក្សាបាន 68.33% និង 59.61% រៀងគ្នា។ បន្ទាប់ពីការភ្ញាស់រយៈពេល 2 ម៉ោងនៅក្នុងសារធាតុ citrate-phosphate buffer (pH 7.0) សកម្មភាពអង់ស៊ីមនៅតែមាន 100%។ ការបន្ថែម 10 mM MgSO₄ និង CuSO₄ បានបង្កើនសកម្មភាពអង់ស៊ីមប្រហែល 21% និង 35% រៀងគ្នា ខណៈពេលដែល NaCl, MnCl₂, KCl និង CaCl₂ បានរារាំងសកម្មភាពអង់ស៊ីម។ ដោយប្រើ ABTS ជាស្រទាប់ខាងក្រោម ប៉ារ៉ាម៉ែត្រចលនវិទ្យា (Km និង Vmax) នៃ *Pleurotus ostreatus* NRC 620 laccase គឺ 1.99 mM និង 16,217 μmol min−1 L−1 រៀងគ្នា។ ការព្យាបាលដោយអង់ស៊ីមនៃគំរូទឹកផ្លែប៉ោមបានកាត់បន្ថយទាំង pH និងភាពស្អិតយ៉ាងច្រើន ហើយការថយចុះនេះមានទំនាក់ទំនងជាមួយនឹងការកើនឡើងនៃពេលវេលាផ្ទុក។ ការព្យាបាលដោយ Laccase បានបណ្តាលឱ្យមានការថយចុះបន្តិចបន្តួចនៃមាតិកា phenolic សរុបនៃទឹកផ្លែប៉ោម ប៉ុន្តែមិនមានការថមថយនៃសកម្មភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្មត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនោះទេ។
ក្នុងរយៈពេលប៉ុន្មានឆ្នាំចុងក្រោយនេះ អ្នកស្រាវជ្រាវបានផ្តោតលើការអនុវត្តជីវបច្ចេកវិទ្យាបៃតងនៅក្នុងឧស្សាហកម្មម្ហូបអាហារ។ ឡាក់កាស គឺជាអង់ស៊ីមមួយក្នុងចំណោមអង់ស៊ីមដែលមានប្រយោជន៍បំផុតនៅក្នុងឧស្សាហកម្មម្ហូបអាហារ ដែលរកឃើញកម្មវិធីនៅក្នុងវិស័យដូចជា ការកែច្នៃទឹកផ្លែឈើ ការដុតនំ ការធ្វើស្ថេរភាពស្រា និងការកែលម្អគុណភាពសរីរាង្គនៃផលិតផលម្ហូបអាហារ។¹រុក្ខជាតិខ្ពស់ៗ និងអតិសុខុមប្រាណជាច្រើនបញ្ចេញឡាក់កាស²ហើយផ្សិតដូចជា deuteromycetes, ascomycetes និង basidiomycetes ក៏អាចផលិតឡាក់កាសផងដែរ។³ឡាក់កាស (EC 1.10.3.2) គឺជាអង់ស៊ីមអុកស៊ីដាសពណ៌ខៀវ ដែលកាត់បន្ថយអុកស៊ីសែនម៉ូលេគុលទៅក្នុងទឹក ដោយប្រើប្រព័ន្ធមួយដែលមានអាតូមទង់ដែងបីផ្សេងគ្នា ដោយហេតុនេះធ្វើអុកស៊ីតកម្មសមាសធាតុហ្វេណុល និងអាមីនអារ៉ូម៉ាទិចជាច្រើនប្រភេទ។ ក្នុងអំឡុងពេលផលិតទឹកផ្លែឈើ និងបន្លែ ការឡើងពណ៌ត្នោតដោយអង់ស៊ីម និងមិនមែនអង់ស៊ីម គឺជាបញ្ហាសំខាន់ៗ។⁴ដោយសារសារធាតុទាំងនេះប៉ះពាល់អវិជ្ជមានដល់ពណ៌ រសជាតិ និងក្លិនក្រអូបនៃទឹកផ្លែឈើ ពួកវាត្រូវតែយកចេញ។⁵
ក្នុងចំណោមផ្លែឈើទាំងអស់ ផ្លែប៉ោមគឺជាផ្លែឈើដែលត្រូវបានបរិភោគច្រើនជាងគេនៅទូទាំងពិភពលោក និងនៅសហភាពអឺរ៉ុប។ នៅឆ្នាំ ២០១៩ ការផលិតផ្លែប៉ោមបានជាប់ចំណាត់ថ្នាក់លេខបីនៅទូទាំងពិភពលោក ដោយលើសពី ៨៧ លានតោន។⁶ផ្លែប៉ោមមានផ្ទុកសមាសធាតុ phenolic ជាច្រើន រួមទាំង flavonoids និងអាស៊ីត phenolic ដូចជាអាស៊ីត caffeic និងអាស៊ីត chlorogenic។⁷ដោយសារតែទឹកផ្លែប៉ោមជាធម្មតាត្រូវបានទទួលទានក្នុងទម្រង់ថ្លារបស់វា ប្រហែល 50% ទៅ 90% នៃសមាសធាតុ phenolic ត្រូវបានបាត់បង់ក្នុងអំឡុងពេលដំណើរការច្រោះ។⁸សព្វថ្ងៃនេះ អ្នកប្រើប្រាស់ច្រើនតែជ្រើសរើសផលិតផលដែលកែច្នៃតិចតួចបំផុត ដូចជាទឹកផ្លែប៉ោមដែលមានផ្ទុកសារធាតុប៉ូលីហ្វេណុលខ្ពស់។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ដោយសារតែវាមានផ្ទុកសារធាតុហ្វេណុលខ្ពស់ ទឹកផ្លែប៉ោមប្រភេទនេះងាយនឹងប្រែពណ៌ និងខ្មៅ។⁹បច្ចេកវិទ្យាផ្សេងៗ រួមទាំងវិធីសាស្ត្រព្យាបាលកំដៅដូចជាការសម្លាប់មេរោគនៅសីតុណ្ហភាព 60–90°C ត្រូវបានប្រើដើម្បីកាត់បន្ថយ ឬការពារការឡើងពណ៌ខ្មៅនៃទឹកផ្លែប៉ោម។¹⁰ទោះយ៉ាងណាក៏ដោយ យោងទៅតាមការស្រាវជ្រាវរបស់ Sauceda-Gálvez¹¹, ដំណើរការកម្ដៅអាចបំផ្លាញសារធាតុគីមីងាយនឹងបង្កជាឧស្ម័ន និងប៉ះពាល់ដល់គុណភាពសរីរាង្គនៃទឹកផ្លែប៉ោម។ ជម្រើសជំនួសវិធីសាស្ត្រដំណើរការកម្ដៅរួមមាន កាបូនឌីអុកស៊ីតលើសកម្រិត វិទ្យុសកម្មអ៊ុលត្រាវីយូឡេ អ៊ុលត្រាសោន សម្ពាធអ៊ីដ្រូស្តាទិចខ្ពស់ ឬការធ្វើឱ្យដូចគ្នានៃសម្ពាធខ្ពស់។¹²ប្រសិទ្ធភាពនៃបច្ចេកវិទ្យាទាំងនេះ និងទិន្នផលនៃទឹកផ្លែឈើសមស្របអាស្រ័យលើប៉ារ៉ាម៉ែត្រដែលបានប្រើ និងលក្ខណៈផលិតផល។ ការប្រើប្រាស់យ៉ាងទូលំទូលាយរបស់ពួកវាត្រូវបានកំណត់ដោយការចំណាយខ្ពស់ ផលប៉ះពាល់អវិជ្ជមានលើគុណភាពនៃផលិតផលអាហារមួយចំនួន ឬការធ្វើឱ្យអង់ស៊ីមអសកម្មមិនគ្រប់គ្រាន់។^{១៣,១៤}
ឡាក់កាសអាចត្រូវបានប្រើដើម្បីធ្វើឱ្យទឹកផ្លែឈើមានស្ថេរភាព និងធ្វើឱ្យទឹកផ្លែឈើថ្លា។¹⁵ហ្គូកមិន និងអ្នកដទៃទៀត។¹⁶សូមណែនាំឱ្យប្រើប្រាស់ឡាក់កាសសម្រាប់ការបន្សុទ្ធទឹកផ្លែឈើ ពីព្រោះវាយកសមាសធាតុហ្វេណុលចេញបានយ៉ាងមានប្រសិទ្ធភាព ដោយបំលែងវាទៅជាប៉ូលីមែរ ឬអូលីហ្គោមែរ ដែលងាយស្រួលយកចេញដោយភ្នាសចម្រោះណាមួយ ដែលអនុញ្ញាតឱ្យទឹកផ្លែប៉ោមរក្សាពណ៌ និងភាពថ្លាដែលមានស្ថេរភាពរហូតដល់ប្រាំមួយសប្តាហ៍នៅសីតុណ្ហភាព 50°C។ ឡាក់កាស *Trichoderma* បន្សុទ្ធត្រូវបានធ្វើឱ្យអសកម្មលើគ្រាប់អាលុយមីញ៉ូម ហើយត្រូវបានប្រើដើម្បីយកសមាសធាតុមិនរសជាតិដែលបណ្តាលមកពីការចម្លងរោគដោយមីក្រុបនៃទឹកផ្លែប៉ោម។¹⁷
ប្រហែល 80-90% នៃសមាសធាតុងាយនឹងបង្កជាឧស្ម័ននៃទឹកផ្លែប៉ោមគឺជាអេស្ទ័រ និងអាល់ដេអ៊ីត ដែលផ្តល់ក្លិនក្រអូបពិសេសដល់ទឹកផ្លែប៉ោម។¹⁸សារធាតុ Laccase ពី *Trametes versicolor* ត្រូវបាន​ធ្វើឱ្យ​មិន​អាច​ធ្វើ​ចលនា​បាន​នៅលើ​ជើងទ្រ​ដែល​មាន​តម្លៃ​ថោក​ដែល​ធ្វើ​ពី​ជាតិ​សរសៃ​ធម្មជាតិ​ពី​សំបក​ដូង​ខ្ចី សម្រាប់​ធ្វើ​ឱ្យ​ទឹក​ផ្លែប៉ោម​ថ្លា។¹⁹ការសិក្សាពីមុនៗបានស៊ើបអង្កេតពីការធ្វើឱ្យទឹកផ្លែប៉ោមមានស្ថេរភាព (ពណ៌ និងភាពច្របូកច្របល់) ដោយប្រើវិធីសាស្ត្រគ្មានអង់ស៊ីម ឬវិធីសាស្ត្រធ្វើឱ្យមិនអាចចល័តបាន ឬរួមផ្សំជាមួយនឹងការច្រោះទឹកយ៉ាងទំនើប។^៥,១៩ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ឥទ្ធិពលនៃឡាក់កាសផ្សិតលើលក្ខណៈសម្បត្តិរូបវិទ្យា-គីមីនៃទឹកផ្លែប៉ោមក្នុងអំឡុងពេលផ្ទុកនៅតែមិនច្បាស់លាស់។ ដូច្នេះ គោលបំណងនៃការសិក្សានេះគឺដើម្បីស៊ើបអង្កេតដោយពិសោធន៍អំពីការផ្លាស់ប្តូរលក្ខណៈសម្បត្តិរូបវិទ្យា-គីមី មាតិកាសមាសធាតុ phenolic និងសកម្មភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្មនៃទឹកផ្លែប៉ោមបន្ទាប់ពីការព្យាបាលជាមួយឡាក់កាសផ្សិត និងការផ្ទុកក្នុងទូរទឹកកករយៈពេលពីរសប្តាហ៍។ ឡាក់កាសមានសមត្ថភាពកត់សុីសមាសធាតុ phenolic ដែលធ្វើឱ្យពួកវាមានសង្ឃឹមសម្រាប់ការប្រើប្រាស់ក្នុងដំណើរការឧស្សាហកម្មផ្សេងៗ រួមទាំងការធ្វើឱ្យទឹកផ្លែឈើថ្លា។ ការសិក្សានេះបានពិនិត្យមើលឡាក់កាសពី *Pleurotus ostreatus* NRC 620 ដោយផ្តោតលើលក្ខខណ្ឌដ៏ល្អសម្រាប់សកម្មភាព និងប្រសិទ្ធភាពរបស់វាក្នុងការធ្វើឱ្យទឹកផ្លែឈើថ្លា។ ខណៈពេលដែលការស្រាវជ្រាវលើផ្សិតអយស្ទ័រ (P. ostreatus NRC 620) នៅតែមានកម្រិត ការសិក្សាពីមុនបានពិនិត្យមើលអង់ស៊ីមពីប្រភពផ្សិតផ្សេងៗ ដូចជា Trametes versicolor និង Ganoderma lucidum។ គោលបំណងនៃការសិក្សានេះគឺដើម្បីវាយតម្លៃការអនុវត្តសក្តានុពលនៃអង់ស៊ីមនេះនៅក្នុងឧស្សាហកម្មម្ហូបអាហារ និងបញ្ជាក់ពីលក្ខណៈសម្បត្តិតែមួយគត់របស់វា ជាពិសេស pH និងសីតុណ្ហភាពដ៏ល្អរបស់វា។
2,2′-Azooxybis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) ត្រូវបានទិញពី Sigma-Aldrich (កាណាដា)។ សារធាតុប្រតិកម្មផ្សេងទៀតទាំងអស់គឺជាថ្នាក់វិភាគ។
មជ្ឈមណ្ឌលប្រមូលផ្ដុំវប្បធម៌អតិសុខុមប្រាណនៃមជ្ឈមណ្ឌលស្រាវជ្រាវជាតិបានទទួលពូជផ្សិតអយស្ទ័រ NRC620 ដែលគេស្គាល់។ បន្ទាប់ពីការដាំដុះរង ពូជនេះត្រូវបានរក្សាទុកនៅលើចានអាហ្គាដំឡូង dextrose នៅសីតុណ្ហភាព 4°C។ វិធីសាស្ត្ររៀបចំផ្សិតមានដូចខាងក្រោម៖ ផ្សិត mycelium អាយុ 10 ថ្ងៃ ដែលលូតលាស់ពេញលេញ ត្រូវបានចាក់លើចានអាហ្គាដំឡូង dextrose ហើយភ្ញាស់នៅសីតុណ្ហភាព 28°C។ បន្ទាប់ពី 10 ថ្ងៃ ប្លុកផ្សិតចំនួនបីដែលមានអង្កត់ផ្ចិត 12 មីលីម៉ែត្រ ត្រូវបានយកចេញពីឧបករណ៍ផ្សព្វផ្សាយអាហ្គា ដោយប្រើឧបករណ៍ចាក់ដែកមាប់មគ ហើយដាក់ក្នុងដប Erlenmeyer ចំណុះ 250 មីលីលីត្រ ជាមួយនឹងឌុយកប្បាស ដែលមានឧបករណ៍ផ្សព្វផ្សាយវប្បធម៌មាប់មគចំនួន 50 មីលីលីត្រ (pH 5.0 ដូចដែលបានពិពណ៌នាពីមុនដោយ Othman et al.²⁰)។ វប្បធម៌ត្រូវបានភ្ញាស់នៅសីតុណ្ហភាព 28°C រយៈពេល 18 ថ្ងៃ។ បន្ទាប់មក វប្បធម៌ត្រូវបានច្រោះតាមរយៈក្រដាសតម្រង Whatman លេខ 1 ហើយសារធាតុរាវខាងលើដែលជាលទ្ធផលបានបម្រើជាប្រភពអង់ស៊ីម។
សកម្មភាពឡាក់កាសត្រូវបានកំណត់ដោយប្រើ ABTS ជាស្រទាប់ខាងក្រោម។ ល្បាយប្រតិកម្ម (2 មីលីលីត្រ) មានផ្ទុក 500 μL នៃ ABTS 0.3 mM (រំលាយក្នុងសារធាតុសូដ្យូមស៊ីត្រាត 0.1 M pH 4.5) និងបរិមាណដែលត្រូវការនៃគំរូអង់ស៊ីមដែលត្រូវបានពនលាយជាមួយទឹកចម្រោះ។^{២១,២២}ដោយពិចារណាថាឡាក់កាសអាចកត់សុី ABTS នៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ (28°C ± 2) អុកស៊ីតកម្ម ABTS ត្រូវបានកំណត់ដោយវាស់ស្ទង់ការកើនឡើងនៃការស្រូបយកនៅ 420 nm (ε_៤២០= ៣៦,០០០ សង់ទីម៉ែត្រ^-1 M ^-1) ដោយប្រើម៉ាស៊ីនវាស់វិសាលគម UV Agilent Carry-100។ ត្រូវការសកម្មភាពឡាក់កាសមួយឯកតាដើម្បីកត់សុី ABTS 1 μmol ក្នុងមួយនាទី។ កំហាប់ប្រូតេអ៊ីនត្រូវបានកំណត់ដោយវិធីសាស្ត្រ Bradford ដោយប្រើអាល់ប៊ុយមីនសេរ៉ូមគោជាការគ្រប់គ្រងផ្ទៃក្នុង។^{២៣,២៤}
បន្ទាប់ពីទទួលបានអង់ស៊ីមពីពូជផ្សិតអយស្ទ័រ NRC 620 សកម្មភាពរបស់វាត្រូវបានវាស់វែងនៅចន្លោះពេលដាំដុះផ្សេងៗគ្នារយៈពេល 25 ថ្ងៃក្រោមលក្ខខណ្ឌឋិតិវន្តនៅសីតុណ្ហភាព 28 អង្សាសេ។
ដើម្បីសិក្សាពីឥទ្ធិពលនៃសីតុណ្ហភាពទៅលើសកម្មភាពឡាក់កាស ការពិសោធន៍ត្រូវបានធ្វើឡើងក្នុងចន្លោះសីតុណ្ហភាពពី 20 ទៅ 90°C។ មុនពេលបន្ថែមអង់ស៊ីម និងចាប់ផ្តើមប្រតិកម្ម សារធាតុទ្រនាប់ (សូដ្យូមស៊ីត្រាត 0.1 M, pH 4.5) និងស្រទាប់ខាងក្រោម (ABTS) ត្រូវបានលាយបញ្ចូលគ្នា និងភ្ញាស់រយៈពេល 5 នាទីនៅសីតុណ្ហភាពផ្សេងៗគ្នា។ ស្ថេរភាពកម្ដៅអង់ស៊ីមត្រូវបានវាយតម្លៃដោយការភ្ញាស់ក្នុងសារធាតុទ្រនាប់សូដ្យូមផូស្វាត 0.05 M (pH 7.0) នៅសីតុណ្ហភាព 40, 50, 60 និង 70°C រយៈពេល 2 ម៉ោងរៀងៗខ្លួន។ បន្ទាប់មក សកម្មភាពសំណល់ត្រូវបានវាយតម្លៃដោយប្រើស្រទាប់ខាងក្រោម ABTS។
ឥទ្ធិពលនៃ pH លើសកម្មភាពឡាក់កាសត្រូវបានវាយតម្លៃដោយប្រើ ABTS ជាស្រទាប់ខាងក្រោមនៅក្នុងសារធាតុសតិបណ្ដោះអាសន្ន citrate-phosphate 0.1 M ដែលមានជួរ pH ពី 2.5 ដល់ 7.0។ ដំណោះស្រាយអង់ស៊ីមត្រូវបានភ្ញាស់នៅសីតុណ្ហភាព 40°C រយៈពេលពីរម៉ោងនៅក្នុងសារធាតុសតិបណ្ដោះអាសន្ន citrate 0.1 M និង Tris (pH 3, 4, 6, និង 7) ដើម្បីវាយតម្លៃស្ថេរភាព pH។ សកម្មភាពសំណល់ជាមួយ ABTS ជាស្រទាប់ខាងក្រោមត្រូវបានគណនាបន្ទាប់ពីការភ្ញាស់។
ឡាក់កាសត្រូវបានភ្ញាស់រយៈពេល 10 នាទីនៅក្នុងសារធាតុសូដ្យូមផូស្វាតបាហ្វ័រ (0.05 M, pH 7.0) ដែលមានអ៊ីយ៉ុងលោហៈជាច្រើនប្រភេទ (Mg2+, Cu2+, Co2+, Ca2+, Zn2+, K+, Na+ និង Mn2+) ក្នុងកំហាប់ 2.5 mM និង 10 mM រៀងៗខ្លួន។ បន្ទាប់មក ស្រទាប់ខាងក្រោម (ABTS) ត្រូវបានបន្ថែមដើម្បីចាប់ផ្តើមប្រតិកម្ម ហើយសកម្មភាពទាក់ទងត្រូវបានវាយតម្លៃ។
អុកស៊ីតកម្ម ABTS ដោយឡាក់កាសនៅកំហាប់ផ្សេងៗ (0.025–3 mM) ត្រូវបានវាស់នៅ pH 4.5 ដើម្បីកំណត់ប៉ារ៉ាម៉ែត្រចលនវិទ្យា (Vmax និង Km)។^ថេរនៃសមីការ Michaelis-Menten ត្រូវបានគណនាដោយប្រើគំនូសតាង Lineweaver-Burk ដែលគូសច្រាសនៃអត្រាប្រតិកម្មជាអនុគមន៍នៃកំហាប់ស្រទាប់ខាងក្រោម។ ថេរចលនវិទ្យាត្រូវបានគណនាពីគំនូសតាង Lineweaver-Burk ដោយប្រើកម្មវិធី GraphPad Prism កំណែ 6.01។
បន្ទាប់ពីលាងផ្លែប៉ោមឱ្យបានស្អាតជាមួយទឹកម៉ាស៊ីនរួច ពួកវាត្រូវបានកាត់ជាពីរ ហើយច្របាច់ទឹកដោយប្រើម៉ាស៊ីនច្របាច់ផ្លែប៉ោម Braun MP80 ស្វ័យប្រវត្តិពេញលេញ (ផលិតនៅប្រទេសអាល្លឺម៉ង់)។ ទឹកផ្លែឈើត្រូវបានច្រោះតាមរយៈក្រណាត់ឈីសចំនួនបួនស្រទាប់។ មិនមានអង់ស៊ីមណាមួយត្រូវបានបន្ថែមទៅក្នុងក្រុមត្រួតពិនិត្យទេ ខណៈពេលដែលឡាក់កាស 2.0% (កំហាប់ដែលមានប្រសិទ្ធភាពបំផុតដែលបានធ្វើតេស្ត) ត្រូវបានបន្ថែមទៅក្នុងទឹកផ្លែប៉ោមដែលទើបរៀបចំថ្មីៗ ដែលបន្ទាប់មកត្រូវបានរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាព 4°C រយៈពេលពីរសប្តាហ៍។
អាស៊ីតដែលអាចវាស់បាន (TA) និង pH ត្រូវបានកំណត់តាមវិធីសាស្ត្រ Boulton et al.^{អាល់.២៧}។ pH នៃគំរូនីមួយៗត្រូវបានវាស់ដោយប្រើម៉ែត្រ pH ឌីជីថល (ម៉ែត្រ pH JENWAY 3510)។ ជាតិអាស៊ីតដែលអាចវាស់បាន (TA) ត្រូវបានគណនាដោយផ្អែកលើអាស៊ីតម៉ាលីកដោយប្រើរូបមន្តដូចខាងក្រោម។
ដែល V និង C ជាបរិមាណ (មីលីលីត្រ) និងកំហាប់ (0.1 ម៉ូល/លីត្រ) នៃដំណោះស្រាយសូដ្យូមអ៊ីដ្រូស៊ីតដែលប្រើក្នុងការវាស់ស្ទង់រៀងៗខ្លួន។ K ជាមេគុណបំលែងអាស៊ីតម៉ាលីក ស្មើនឹង 0.067 និង W ជាម៉ាស់ (ក្រាម) នៃទឹកផ្លែប៉ោម។
សារធាតុរឹងរលាយសរុប (^{ធីឌីអេស}) មាតិកានៃសំណាកទឹកផ្លែឈើទាំងអស់ត្រូវបានកំណត់ដោយប្រើឧបករណ៍វាស់ស្ទង់ PAL-1 (ATAGO, តូក្យូ, ជប៉ុន)។ បន្ទាប់ពីការវាស់វែងនីមួយៗ កែវភ្នែកត្រូវបានលាងសម្អាតជាមួយទឹកដែលគ្មានអ៊ីយ៉ូដ ហើយសំណាកទឹកផ្លែប៉ោមនីមួយៗត្រូវបានធ្វើតេស្តបីដង។ តម្លៃសម្រាប់សំណាកនីមួយៗត្រូវបានគណនាដោយការមធ្យមភាគនៃការវាស់វែងទាំងបី។ មធ្យម ± គម្លាតស្តង់ដារសម្រាប់សំណាកទឹកផ្លែប៉ោមនីមួយៗក៏ត្រូវបានគណនាដោយការមធ្យមភាគលទ្ធផលទាំងនេះផងដែរ។
ភាពស្អិតនៃសំណាកទឹកផ្លែប៉ោមត្រូវបានវាយតម្លៃដោយប្រើឧបករណ៍វាស់ស្ទង់ភាពស្អិតបង្វិល (RV, Rheotest 2, អាល្លឺម៉ង់)។ សំណាកត្រូវបានដាក់នៅខាងក្នុងស៊ីឡាំង "S2" នៃឧបករណ៍វាស់ស្ទង់ភាពស្អិត។ ភាពស្អិតជាក់ស្តែងត្រូវបានតំណាងដោយជម្រាលនៃខ្សែកោងភាពតានតឹងកាត់ទល់នឹងខ្សែកោងអត្រាកាត់ ដែលត្រូវបានគណនាចេញពីភាពតានតឹងកាត់ និងខ្សែកោងដែលត្រូវគ្នានៅអត្រាកាត់ផ្សេងៗ (ពី 1.00 ដល់ 437.4 s⁻¹)។ រូបមន្តសម្រាប់គណនាភាពស្អិតជាក់ស្តែងមានដូចខាងក្រោម៖
ដែល η ជា viscosity ជាក់ស្តែង (cP), τ ជា stress កាត់ (dyn/cm²), γ ជា speed កាត់ (sec⁻¹), និង (τ) ត្រូវបានគណនាដោយប្រើ torque (α) និងតម្លៃស៊ីឡាំង (Z) ដោយប្រើរូបមន្តដូចខាងក្រោម៖ τ = Z. α។
សន្ទស្សន៍ពណ៌ត្នោតត្រូវបានកំណត់ដោយវិធីសាស្ត្ររបស់ Meidav ​​​​et^{អាល់.២៩}សំណាកទឹកផ្លែឈើ 10 មីលីលីត្រ ត្រូវបានបង្វិលក្នុងល្បឿន 2750 xg រយៈពេល 10 នាទី។ សារធាតុរាវលើស 5 មីលីលីត្រ ត្រូវបានលាយជាមួយអេតាណុល 95% 5 មីលីលីត្រ។ ការស្រូបយកល្បាយនេះត្រូវបានវាស់នៅ 420 nm ដោយប្រើម៉ាស៊ីនវិសាលគមកាំរស្មីយូវី Shimadzu (UV-1601 PC)។
មាតិកាហ្វេណុលសរុប (TPC) ត្រូវបានកំណត់តាមពណ៌ដោយប្រើសារធាតុ Folin-Ciocalteu ដូចដែលបានពិពណ៌នាដោយ Boulton et al។^[២៧]]។ ខ្សែកោងស្តង់ដារនៃអាស៊ីតហ្គាលីកត្រូវបានបង្កើតឡើងសម្រាប់កំហាប់ចាប់ពី 0 ដល់ 500 មីលីក្រាម/លីត្រ (^រ.ម.= 0.997)។ លទ្ធផលត្រូវបានបង្ហាញជាសមមូលអាស៊ីតហ្គាលីក (មីលីក្រាម GAE/មីលីលីត្រ)។
បន្ថែមទឹកចម្រោះចំនួន 125 μL និងដំណោះស្រាយ FRAP ចំនួន 2850 μL ទៅក្នុងទឹកផ្លែប៉ោមចំនួន 25 μL ហើយទុកល្បាយនេះនៅកន្លែងងងឹតរយៈពេល³⁰នាទី​។ បន្ទាប់មកវាស់ការស្រូបយកនៅ 593 nm ដោយប្រើម៉ាស៊ីនវិភាគពន្លឺ Shimadzu UV (UV-1601 PC)។ សារធាតុប្រតិកម្ម FRAP ត្រូវបានរៀបចំដោយលាយសារធាតុ acetate buffer 300 mM (pH 3.6) iron(III) chloride 20 mM និង 10 mM 2,4,6-tris(2-pyridyl)triazine (TPTZ) (រំលាយក្នុង 40 mM HCl) ក្នុងសមាមាត្រ 10:1:1។ ខ្សែកោងស្តង់ដារមួយត្រូវបានបង្កើតដោយប្រើ Trolox ជាស្តង់ដារ (^R²= 0.999) ហើយលទ្ធផលត្រូវបានបង្ហាញជា μM Trolox/mL។
សកម្មភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្មនៃទឹកផ្លែឈើដែលបានព្យាបាល និងមិនបានព្យាបាលត្រូវបានកំណត់ដោយប្រើវិធីសាស្ត្រ DPPH ដើម្បីវាយតម្លៃសមត្ថភាពរបស់វាក្នុងការកំចាត់រ៉ាឌីកាល់សេរី DPPH។³¹ទឹកផ្លែឈើចំនួនដប់មីក្រូលីត្រត្រូវបានលាយជាមួយនឹងដំណោះស្រាយ DPPH ចំនួន 1 មីលីលីត្រ (100 μM) ក្នុងមេតាណុល។ បន្ទាប់ពីមានប្រតិកម្មក្នុងទីងងឹតរយៈពេល 30 នាទី ការស្រូបយកនៃល្បាយនេះត្រូវបានវាស់នៅ 517 nm ដោយប្រើម៉ាស៊ីនវិសាលគម Shimadzu UV (UV-1601 PC)។ លទ្ធផលត្រូវបានបង្ហាញជាសមមូល trolox (μM trolox/ml) ដោយផ្អែកលើខ្សែកោងក្រិតតាមខ្នាត (_^R2= ០.៩៩០)។
ទិន្នន័យដែលទទួលបានបានបង្ហាញថា ការផលិតឡាក់កាសអតិបរមាត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅក្នុងផ្សិតអយស្ទ័រ NRC 620 នៅចុងបញ្ចប់នៃថ្ងៃទី 18 នៃការ fermentation ដោយឈានដល់សកម្មភាព 1302 U/L។ នេះបានបម្រើជាមូលដ្ឋានសម្រាប់កំណត់ពេលវេលាដាំដុះល្អបំផុតសម្រាប់ការផលិតឡាក់កាស (រូបភាពទី 1)។ ទោះបីជាការផលិតអង់ស៊ីមកើនឡើងជាមួយនឹងពេលវេលាដាំដុះកើនឡើងក៏ដោយ អត្រានៃការកើនឡើងមិនសមាមាត្រដោយផ្ទាល់ទៅនឹងពេលវេលាដាំដុះនោះទេ។ បន្ទាប់ពី 21 ថ្ងៃ សកម្មភាពអង់ស៊ីមបានកើនឡើងត្រឹមតែ 90 U/L (ដល់ 1390 U/L)។ ដូច្នេះ 18 ថ្ងៃត្រូវបានជ្រើសរើសជាពេលវេលាដាំដុះល្អបំផុតដើម្បីធ្វើឱ្យមានតុល្យភាពរវាងទិន្នផលផលិតផលជាមួយនឹងអត្ថប្រយោជន៍សេដ្ឋកិច្ចនៃពេលវេលាដាំដុះកើនឡើង។
ឥទ្ធិពលនៃពេលវេលាដាំដុះលើទិន្នផលឡាក់កាសនៅក្នុង Pleurotus ostreatus NRC 620។ ប្លុកមីសេលៀលផ្សិតចំនួនបី (12 mm) ត្រូវបានចាក់ចូលទៅក្នុងឧបករណ៍ផ្ទុកមេរោគចំនួន 50 មីលីលីត្រ ហើយបន្ទាប់មកដាំដុះនៅសីតុណ្ហភាព 28°C សម្រាប់ពេលវេលាផ្សេងៗគ្នា។
ស្រប​នឹង​ការ​សិក្សា​ផ្សេង​ទៀត លទ្ធផល​របស់​យើង​បង្ហាញ​ថា រយៈពេល​ដាំដុះ​ដ៏​ល្អ​បំផុត​ដើម្បី​សម្រេច​បាន​នូវ​ការ​បញ្ចេញ​ឡាក់កាស​កម្រិត​ខ្ពស់​បំផុត​ដោយ​ផ្សិត​ទំនង​ជា​ស្ថិត​នៅ​ចន្លោះ​ពី 7 ទៅ 36 ថ្ងៃ។³²យោងតាមលោក Ezike និងអ្នកដទៃទៀត។³³, *Trametes polyzona* WRF03 បានផលិតឡាក់កាសក្នុងបរិមាណខ្ពស់បំផុតនៅចុងបញ្ចប់នៃថ្ងៃទីប្រាំបួននៃដំណើរការ fermentation ជាមួយនឹងសកម្មភាពជាក់លាក់នៃប្រូតេអ៊ីន 1637 U/mg។ លើសពីនេះ Othman et al.³⁴បានរកឃើញថា *Trichoderma harzianum* S7113 បានបញ្ចេញឡាក់កាសក្នុងបរិមាណច្រើននៅថ្ងៃទីប្រាំនៃការដាំដុះ។ អត្រាផលិតឡាក់កាសបានឈានដល់សកម្មភាពកំពូលនៅថ្ងៃទីដប់បួន ហើយបន្ទាប់មកបានថយចុះបន្តិចម្តងៗ។³⁴ទោះបីជាការបញ្ចេញអង់ស៊ីមក៏អាចកើតឡើងក្នុងដំណាក់កាលលូតលាស់សំខាន់ក៏ដោយ ជាធម្មតាវាឡើងដល់កម្រិតកំពូលក្នុងដំណាក់កាលមធ្យម ហើយត្រូវបានបង្កឡើងដោយការប្រើប្រាស់ប្រភពកាបូន ឬអាសូត។^{៣៤,៣៥}
ទោះបីជាឡាក់កាសពី Pleurotus ostreatus NRC 620 បានបង្ហាញពីសកម្មភាពខ្ពស់លើជួរសីតុណ្ហភាពធំទូលាយចាប់ពី 50°C ដល់ 80°C ដែលជិតដល់សកម្មភាពកំពូល (69–98%) ក៏ដោយ សកម្មភាពអតិបរមារបស់វាត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅសីតុណ្ហភាព 70°C (រូបភាពទី 2a)។ នៅខាងក្រៅជួរសីតុណ្ហភាពនេះ សកម្មភាពអង់ស៊ីមបានថយចុះប្រហែល 70°C។ លទ្ធផលទាំងនេះបង្ហាញថាអង់ស៊ីមសកម្មនៅសីតុណ្ហភាពខ្ពស់ ដែលទំនងជាដោយសារតែសីតុណ្ហភាពខ្ពស់បង្កើនថាមពលចលនានៃប្រតិកម្ម។
ឥទ្ធិពលនៃសីតុណ្ហភាពប្រតិកម្ម (ក) និង pH (ខ) ទៅលើសកម្មភាពឡាក់កាសនៅក្នុង *Pleurotus ostreatus* NRC 620។ សីតុណ្ហភាពចាប់ពី 20 ដល់ 90 °C ត្រូវបានសម្រេចដោយការភ្ញាស់ល្បាយជាមុននៅសីតុណ្ហភាពផ្សេងៗគ្នារយៈពេល 5 នាទីមុនពេលបន្ថែមអង់ស៊ីម និងចាប់ផ្តើមប្រតិកម្ម។ ឥទ្ធិពលនៃ pH ទៅលើសកម្មភាពឡាក់កាសត្រូវបានវាយតម្លៃដោយប្រើ ABTS ជាស្រទាប់ខាងក្រោមនៅក្នុងដំណោះស្រាយដែលមានសារធាតុ buffer citrate-phosphate 0.1 M លើជួរ pH ពី 2.5 ដល់ 7.0។
យោងតាមលោក Ezike និង^{អាល់.៣៣}សីតុណ្ហភាពល្អបំផុតសម្រាប់ *Trametes polyzona* WRF03 laccase គឺ 55 °C ដែលដូចគ្នានឹងសីតុណ្ហភាពសម្រាប់ *Ganoderma lucidum*។^{ឡាក់កាស៣៦}និងស្រដៀងគ្នាទៅនឹងសីតុណ្ហភាពល្អបំផុត (50 °C) សម្រាប់ *Trametes polyzona* KU-RNW02737^{ឡាក់កាស} . ^{បាល់ឌ្រៀន៣៨}កត់សម្គាល់ថា ដូចជាប្រព័ន្ធអង់ស៊ីមបំបែកលីញីនផ្សេងទៀតដែរ ជួរសីតុណ្ហភាពដ៏ល្អសម្រាប់ឡាក់កាសគឺចន្លោះពី 50 ទៅ 70 °C។
លទ្ធផលបានបង្ហាញថា អង់ស៊ីមបានបង្ហាញពីសកម្មភាពខ្ពស់បំផុតនៅ pH 3.0 ដោយឈានដល់សកម្មភាព 94% នៅ pH 3.5។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ វានៅតែសកម្មលើជួរ pH ធំទូលាយពី 2.5 ដល់ 7.0 (រូបភាពទី 2b)។ លើសពីនេះ វាបានបង្ហាញសកម្មភាពខ្ពស់ជាងនៅក្នុងលក្ខខណ្ឌអាស៊ីតបើប្រៀបធៀបទៅនឹងលក្ខខណ្ឌអព្យាក្រឹត ឬអាល់កាឡាំង។ សកម្មភាពរបស់វានៅតែមានយ៉ាងហោចណាស់ 77% លើជួរ pH ពី 2.5 ដល់ 4.5 ប៉ុន្តែឈានដល់ប្រហែល 38% ប៉ុណ្ណោះនៅ pH 7.0។ pH ល្អបំផុតសម្រាប់ឡាក់កាសពី *Trametes polyzona* WRF03 គឺ 4.533 ដែលដូចគ្នានឹង pH សម្រាប់ឡាក់កាសពី *Trametes polyzona* KU-RNW02737, *Trichoderma harzanium* 39, *Pleurotus* sp. 40, និង *Trametes hirsuta* 41។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ យោងតាមការសិក្សាដោយ Chairin et al.⁴²pH ល្អបំផុតសម្រាប់ឡាក់កាសពី *Polymorpha f. sp.* WR710-1 គឺ 2.2 ខណៈពេលដែល pH ល្អបំផុតសម្រាប់ឡាក់កាសពី *Polymorpha f. sp.* IBL-04 គឺ 5.043។ ការភ្ជាប់នៃអានីយ៉ុងអ៊ីដ្រូស៊ីត (សារធាតុទប់ស្កាត់ឡាក់កាស) ទៅនឹងអាតូមទង់ដែងនៃឡាក់កាស T2/T3 អាចជាមូលហេតុនៃការថយចុះសកម្មភាពឡាក់កាសក្រោមលក្ខខណ្ឌ pH អព្យាក្រឹត ឬអាល់កាឡាំង។ នេះអាចរំខានដល់ការផ្ទេរអេឡិចត្រុងខាងក្នុងពីមជ្ឈមណ្ឌល T1 ទៅមជ្ឈមណ្ឌល T2/T3 ដោយហេតុនេះ^{ការកំណត់}សកម្មភាពអង់ស៊ីម ២៣,៤៤
តាមរយៈការភ្ញាស់អង់ស៊ីមនៅសីតុណ្ហភាពផ្សេងៗគ្នា គេបានរកឃើញថាទាំងពេលវេលាភ្ញាស់ និងសីតុណ្ហភាពបានប៉ះពាល់ដល់ស្ថេរភាពអង់ស៊ីម។ ជាពិសេស ឡាក់កាសពី *Trametes polyzona* NRC 620 បានបង្ហាញពីស្ថេរភាពខ្ពស់ជាងនៅសីតុណ្ហភាព 40℃ និង 50℃ ដោយរក្សាបាន 68.33% និង 59.61% នៃសកម្មភាពដំបូងរៀងៗខ្លួន បន្ទាប់ពីរយៈពេល 120 នាទី (រូបភាពទី 3a)។ ផ្ទុយទៅវិញ ក្រោមលក្ខខណ្ឌដូចគ្នា (40℃ និង 50℃ 120 នាទី) ឡាក់កាសពី *Trametes polyzona* WRF03 រក្សាបាន 64.38% និង 42.92% នៃសកម្មភាពរៀងៗខ្លួន។³³ផ្ទុយទៅវិញ ការបង្កើនពេលវេលាភ្ញាស់ និងសីតុណ្ហភាពបានធ្វើឱ្យស្ថេរភាពនៃឡាក់កាស *Trametes polyzona* NRC 620 ថយចុះ; បន្ទាប់ពីការភ្ញាស់នៅសីតុណ្ហភាព 60℃ និង 70℃ រយៈពេល 60 នាទី សកម្មភាពរបស់វាបានថយចុះមកត្រឹម 39.24% និង 1.72% រៀងគ្នា (រូបភាពទី 3a)។ ស្របនឹងលទ្ធផលពិសោធន៍ ឡាក់កាសពី *Trametes polyzona* WRF03 បានបង្ហាញពីស្ថេរភាពខ្ពស់ជាងនៅ 40 និង 50℃ ពេញមួយដំណើរការព្យាបាលដោយកម្ដៅ។³³ស្រដៀងគ្នានេះដែរ លឿងជារឿនគិត និង^{អាល់.៣៧}និង ឆាយរីន និង^{អាល់.៤២}បានរាយការណ៍ពីស្ថេរភាពនៃឡាក់កាសពី Trametes polyzona KURNW027 និង Trametes polyzona WR710-1 នៅសីតុណ្ហភាព 50°C រយៈពេល 1 ម៉ោងរៀងៗខ្លួន។ ក្នុងនាមជាជីវកាតាលីករដ៏មានប្រយោជន៍ដែលអាចអនុវត្តបានក្នុងវិស័យជីវបច្ចេកវិទ្យាផ្សេងៗ ឡាក់កាសគួរតែមានស្ថេរភាព និងដំណើរការល្អលើជួរសីតុណ្ហភាពធំទូលាយ។
ស្ថេរភាពកម្ដៅ (ក) និងស្ថេរភាព pH (ខ) នៃឡាក់កាសពី *Pleurotus ostreatus* NRC 620។ ស្ថេរភាពកម្ដៅត្រូវបានវាយតម្លៃដោយការភ្ញាស់ដំណោះស្រាយអង់ស៊ីមនៅក្នុងសារធាតុសូដ្យូមផូស្វាត 0.05 M (pH 7.0) នៅសីតុណ្ហភាព 40, 50, 60 និង 70 °C រយៈពេល 2 ម៉ោងរៀងៗខ្លួន។ ស្ថេរភាព pH ត្រូវបានវាយតម្លៃដោយការភ្ញាស់ដំណោះស្រាយអង់ស៊ីមនៅក្នុងសារធាតុស៊ីត្រាត 0.1 M និងសារធាតុ Tris (pH 3, 4, 6 និង 7) នៅសីតុណ្ហភាព 40 °C រយៈពេល 2 ម៉ោង។ សកម្មភាពសំណល់ត្រូវបានគណនាដោយប្រើ ABTS ជាស្រទាប់ខាងក្រោមបន្ទាប់ពីការភ្ញាស់។
ដើម្បីកំណត់លក្ខខណ្ឌល្អបំផុតសម្រាប់ការប្រើប្រាស់ និងការផ្ទុកអង់ស៊ីម យើងបានស៊ើបអង្កេតពីឥទ្ធិពលនៃ pH លើស្ថេរភាពឡាក់កាស។ ការប៉ះពាល់នឹងតម្លៃ pH ផ្សេងៗគ្នាបានប៉ះពាល់យ៉ាងខ្លាំងដល់ស្ថេរភាពនៃរចនាសម្ព័ន្ធប្រូតេអ៊ីន ដោយហេតុនេះជះឥទ្ធិពលដល់ស្ថេរភាព និងសកម្មភាពរបស់ម៉ូលេគុលអង់ស៊ីម។ លទ្ធផលបានបង្ហាញថា អង់ស៊ីមមានស្ថេរភាពតិចជាងក្រោមលក្ខខណ្ឌអាស៊ីត ខណៈពេលដែលវាបង្ហាញពីស្ថេរភាពកាន់តែប្រសើរឡើងនៅតម្លៃ pH ខ្ពស់ជាង (តំបន់អព្យាក្រឹត និងអាល់កាឡាំង)។ នៅតម្លៃ pH 7.0, 6.0, 4.0 និង 3.0 អត្រារក្សាអង់ស៊ីមបន្ទាប់ពី 120 នាទីគឺប្រហែល 100%, 62.54%, 52.39% និង 11.14% រៀងគ្នា (រូបភាពទី 3b)។ *Strombus multisus* WRF03 ឡាក់កាសបានបង្ហាញពីស្ថេរភាពខ្ពស់ជាងនៅតម្លៃ pH អព្យាក្រឹត (5.5–6.5) និងស្ថេរភាពទាបជាងនៅតម្លៃ pH អាស៊ីត (ក្រោម 4.0)។ បន្ទាប់ពី 120 នាទី នៅតម្លៃ pH 5.5, 6.0 និង 6.5 អត្រារក្សាអង់ស៊ីមមានប្រហែល 82%, 100% និង 93% រៀងគ្នា។³³ខារីន និងអ្នកដទៃទៀត។⁴²បានកត់សម្គាល់ថា ឡាក់កាស ពី Trametes polyzona WR710-1 មានស្ថេរភាពក្នុងចន្លោះ pH ពី 6.0 ដល់ 7.0 ខណៈពេលដែល Sayed et al.⁴⁵បានបង្ហាញថា ឡាក់កាសមានស្ថេរភាពជាងនៅក្រោមលក្ខខណ្ឌ pH អព្យាក្រឹត។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ឡាក់កាសពី Cerrena unicolor ក៏បានបង្ហាញពីស្ថេរភាពនៅក្រោមលក្ខខណ្ឌអាល់កាឡាំង (pH 9.0) ផងដែរ។⁴⁶ឡាក់កាស​ដែល​បាន​សិក្សា​បាន​បង្ហាញ​ពី​ស្ថេរភាព​ខ្ពស់​លើ​ជួរ pH ដ៏​ធំទូលាយ។ នេះ​អាច​ជា​លក្ខណៈ​សំខាន់​សម្រាប់​កម្មវិធី​ឧស្សាហកម្ម។
ដោយសារអ៊ីយ៉ុងលោហៈមួយចំនួនមានឥទ្ធិពលរំញោច និងរារាំងលើសកម្មភាពអង់ស៊ីម ឥទ្ធិពលរបស់វាទៅលើសកម្មភាពអង់ស៊ីមត្រូវតែពិចារណានៅក្នុងកម្មវិធីឧស្សាហកម្ម។ នេះជារឿងសំខាន់ព្រោះអ៊ីយ៉ុងលោហៈគឺជាសារធាតុបំពុលបរិស្ថានទូទៅដែលអាចប៉ះពាល់ដល់ស្ថេរភាព និងការសំយោគអង់ស៊ីមក្រៅកោសិកា។⁴⁷ដើម្បីស៊ើបអង្កេតពីផលប៉ះពាល់នៃអ៊ីយ៉ុងលោហៈច្រើនលើឡាក់កាសពី *Pleurotus ostreatus* NRC 620 យើងបានធ្វើពិសោធន៍ដែលត្រូវគ្នា។ ដូចបង្ហាញក្នុងរូបភាពទី 4 អាស្រ័យលើប្រភេទលោហៈដែលប្រើ ការបង្កើនកំហាប់អ៊ីយ៉ុងលោហៈពី 2.5 mM ដល់ 10 mM បានប៉ះពាល់អវិជ្ជមានដល់មុខងារអង់ស៊ីម។ ឧទាហរណ៍^Mg²⁺ , ^Co²⁺ , ^{ស័ង្កសី}និង^Cu²⁺អាចជំរុញ និងធ្វើឱ្យសកម្មភាពអង់ស៊ីមសកម្ម ខណៈពេលដែល^ណា⁺ , ^Mn²⁺ , ^Ca²⁺និង^K⁺អាចរារាំងសកម្មភាពអង់ស៊ីម។ នៅកំហាប់ 10 mM អ៊ីយ៉ុង Cu²⁺ និង Mg²⁺ គឺជាសារធាតុធ្វើឱ្យសកម្មដ៏មានឥទ្ធិពលបំផុតនៃសកម្មភាពឡាក់កាសពី *Pleurotus ostreatus* NRC 620 ដែលផ្តល់នូវកម្រិតធ្វើឱ្យសកម្មប្រហែល 34% និង 20% រៀងគ្នា។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ នៅកំហាប់ 10 mM អ៊ីយ៉ុង Ca²⁺ គឺជាសារធាតុទប់ស្កាត់ដ៏មានឥទ្ធិពលបំផុតនៃឡាក់កាស ដែលកាត់បន្ថយសកម្មភាពអង់ស៊ីមប្រហែល 60%។
ឥទ្ធិពលនៃអ៊ីយ៉ុងលោហៈទៅលើសកម្មភាពរបស់ Pleurotus ostreatus NRC 620 laccase។ laccase ត្រូវបានភ្ញាស់រយៈពេល 10 នាទីនៅក្នុងសូដ្យូមផូស្វាតបាហ្វើរ (0.05 M, pH 7.0) ដែលមានអ៊ីយ៉ុងលោហៈផ្សេងៗគ្នាក្នុងកំហាប់ 2.5 mM និង 10 mM។ បន្ទាប់មកប្រតិកម្មត្រូវបានផ្តួចផ្តើមដោយការបន្ថែមស្រទាប់ខាងក្រោម (ABTS) បន្ទាប់ពីនោះសកម្មភាពទាក់ទងត្រូវបានវាស់វែង។
លទ្ធផលរបស់យើងគឺស្របនឹងលទ្ធផលរបស់អ្នកនិពន្ធផ្សេងទៀតដែលបានរកឃើញថា Mg²⁺ និង Cu²⁺ បង្កើនសកម្មភាពរបស់ *Trametes polyzona* WRF03³។ Castaño et al.⁴⁸ បានរកឃើញថា ឡាក់កាសពី *Xylaria* sp. ត្រូវបានជំរុញក្នុងកម្រិតខ្លះដោយអ៊ីយ៉ុងទង់ដែង (Cu²⁺)។ លើសពីនេះ Foroutanfar et al.⁴⁹ និង Si et al.⁵⁰ បានធ្វើការសិក្សាស្រដៀងគ្នាលើឡាក់កាសពី *Paraconiothyrium variabile* និង *Trametes pubescens* រៀងៗខ្លួន។ កន្លែងចងទង់ដែងប្រភេទទី II (T2) នៃអង់ស៊ីមនេះអាចត្រូវបានឆ្អែតដោយ Cu²⁺ នៅកំហាប់ដែលបានផ្តល់ឱ្យ ដែលអាចពន្យល់ពីការរំញោចសកម្មភាពឡាក់កាសនៅកំហាប់ Cu²⁺³⁹ ខ្ពស់ជាង។ ដោយសារតែផ្សិតរលួយពណ៌ស ឡាក់កាស គឺជាអុកស៊ីដាសដែលមានអាតូមទង់ដែងច្រើន ផលប៉ះពាល់នៃអ៊ីយ៉ុងទង់ដែងលើសកម្មភាពឡាក់កាសគឺមានភាពចម្រុះ និងមានចាប់ពីរំញោច និងរារាំងរហូតដល់អព្យាក្រឹត។⁵¹ ផ្ទុយទៅវិញ Zhou et al^{។ [52]}បានរាយការណ៍ថា^Cu²⁺បានរារាំងសកម្មភាពឡាក់កាសរបស់សត្វកណ្ដៀរក្រោមដីតៃវ៉ាន់ (Odontotermes formosanus)។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ឡាក់កាសរបស់ Cerena sp. HYB07^[៥៣]និង Clitocybe maxima^[៥៤]មិនត្រូវបានប៉ះពាល់ដោយអ៊ីយ៉ុងទង់ដែងទេ។
ភាពជាក់លាក់នៃស្រទាប់ខាងក្រោមត្រូវបានតំណាងដោយប៉ារ៉ាម៉ែត្រចលនវិទ្យារបស់វា (Km និង Vmax)។ កាលណាចំណងភ្ជាប់នៃស្រទាប់ខាងក្រោមទៅនឹងអង់ស៊ីមកាន់តែខ្លាំង តម្លៃ Km កាន់តែទាប និងភាពជាក់លាក់នៃស្រទាប់ខាងក្រោមកាន់តែខ្ពស់។^{៣, ២១, ៥៥}ប៉ារ៉ាម៉ែត្រ​ចលនា (Km និង Vmax) នៃ​ឡាក់កាស​ពី *Pleurotus ostreatus* NRC 620 ត្រូវ​បាន​កំណត់​ដោយ​ប្រើ​កម្មវិធី GraphPad Prism 6.0 ដោយ​គូស​គំនូស​បន្ទាត់ Lineweaver-Burk (រូបភាពទី 5)។ នៅពេល​ប្រើ ABTS ជា​ស្រទាប់​ខាងក្រោម លទ្ធផល​គឺ 1.99 mM និង 16217 μmol។^{នាទី⁻¹ ល⁻¹,}រៀងៗខ្លួន។ Elsayed និងអ្នកដទៃទៀត។²¹បានរាយការណ៍ថាតម្លៃ Km សម្រាប់អុកស៊ីតកម្ម ABTS គឺ 0.1 mM និង 0.064 mM រៀងគ្នា ដែលបង្ហាញពីភាពស្និទ្ធស្នាលខ្ពស់នៃអ៊ីសូអង់ស៊ីម Lac A និង Lac B សម្រាប់ ABTS។ លើសពីនេះ តម្លៃ Vmax គឺ 0.182 μmol^{នាទី⁻¹}និង ០,៦០៣ មីក្រូម៉ូល^{នាទី⁻¹}រៀងគ្នា។ តម្លៃ Km ដែលទទួលបានគឺទាបជាងតម្លៃ Trametes polyzona WRF03 (8.66 mM)។ លើសពីនេះ តម្លៃ Vmax របស់វា (1429 mmol min⁻¹) ក៏^{ទាបជាង}នៅពេលប្រើ ABTS ជាស្រទាប់ខាងក្រោម។33 ស្រដៀងគ្នានេះដែរ តម្លៃ Km នៃកំហាប់ឡាក់កាស Lentinus squarrosulus MR13 និង Trametes sp. AH28-2 គឺ 0.0714 mM និង 0.025 mM រៀងគ្នា ហើយតម្លៃ Vmax គឺ 0.0091 mM min−1 និង 0.67 mM min−1 mg−1 (ទាក់ទងទៅនឹង ABTS)^{រៀងគ្នា។ ៥៦,៥៧}
ឥទ្ធិពលនៃកំហាប់ ABTS ទៅលើសកម្មភាពរបស់ឡាក់កាសពី *Pleurotus ostreatus* NRC 620 ត្រូវបានស៊ើបអង្កេត ហើយគំនូសតាង Lineweaver-Burk នៃចំរាស់នៃល្បឿនប្រតិកម្មដំបូងទល់នឹងកំហាប់ ABTS ត្រូវបានគូស។ ប្រតិកម្មអុកស៊ីតកម្មនៃ ABTS ជាមួយនឹងកំហាប់ផ្សេងៗគ្នា (0.025–3.0 mM) នៃឡាក់កាសត្រូវបានវាស់នៅ pH 4.5 ដើម្បីកំណត់ប៉ារ៉ាម៉ែត្រចលនវិទ្យា (Vmax និង Km)។ ថេរចលនវិទ្យា Michaelis-Menten ត្រូវបានគណនាដោយប្រើគំនូសតាង Lineweaver-Burk នៃចំរាស់នៃល្បឿនប្រតិកម្មទល់នឹងកំហាប់ស្រទាប់ខាងក្រោម។ ថេរចលនវិទ្យាត្រូវបានគណនាពីគំនូសតាង Lineweaver-Burk ដោយប្រើកម្មវិធី GraphPad Prism 6.01។
អង់ស៊ីម​បន្សុទ្ធ​បែបប្រពៃណី ដូចជា​សារធាតុ​ប៉ិចទីណាស បំបែក​សារធាតុ​ប៉ិចទីក ដោយ​កាត់បន្ថយ​ភាពស្អិត និង​ភាពច្របូកច្របល់។ ពួកវា​បំបែក​សារធាតុ​ប៉ូលីសាខ័រ​រចនាសម្ព័ន្ធ​បាន​យ៉ាង​មាន​ប្រសិទ្ធភាព ហើយ​ជារឿយៗ​ត្រូវ​បាន​ប្រើ​រួមផ្សំ​ជាមួយ​អង់ស៊ីម​ផ្សេងទៀត ដូចជា​សែលុយឡូស និង​ហេមីសែលលូស ដើម្បី​បង្កើន​ទិន្នផល និង​ភាពច្បាស់លាស់។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ សារធាតុ​ប៉ិចទីណាស​មិន​កំណត់​គោលដៅ​ជាក់លាក់​ទៅលើ​សមាសធាតុ​ហ្វេណុល ដែលជា​កត្តា​ចម្បង​ដែល​ធ្វើឱ្យ​មាន​ភាពច្របូកច្របល់ និង​ការឡើង​ពណ៌ត្នោត​អុកស៊ីតកម្ម ជាពិសេស​នៅក្នុង​ទឹកផ្លែឈើ​ដូចជា​ទឹកផ្លែប៉ោម និង​ទឹកទំពាំងបាយជូរ។⁵⁸ផ្ទុយទៅវិញ ឡាក់កាសជំរុញអុកស៊ីតកម្មនៃសមាសធាតុហ្វេណុល ដែលធ្វើឱ្យពួកវាក្លាយជាម៉ូលេគុលធំៗដែលមិនរលាយ ដែលអាចត្រូវបានយកចេញដោយការធ្លាក់ដី ឬការច្រោះ។ យន្តការនេះមិនត្រឹមតែធ្វើអោយប្រសើរឡើងនូវភាពថ្លាប៉ុណ្ណោះទេ ប៉ុន្តែវាថែមទាំងពន្យារអាយុកាលនៃទឹកផ្លែឈើដោយកាត់បន្ថយលទ្ធភាពនៃការឡើងពណ៌ត្នោតអុកស៊ីតកម្មដែលបណ្តាលមកពីសមាសធាតុហ្វេណុល។ លើសពីនេះ ដំណើរការធ្វើឱ្យថ្លាដែលមានមូលដ្ឋានលើឡាក់កាសអាចត្រូវបានអនុវត្តក្រោមលក្ខខណ្ឌដំណើរការស្រាល (pH 3.5–5.5 សីតុណ្ហភាព 25–40 °C) ដែលធ្វើឱ្យវាសមស្របសម្រាប់ទឹកផ្លែឈើឆ្ងាញ់ៗដោយមិនធ្វើឱ្យប៉ះពាល់ដល់លក្ខណៈសម្បត្តិអាហារូបត្ថម្ភ ឬសរីរាង្គរបស់វា។⁵⁹ការសិក្សាបានបង្ហាញថា ការព្យាបាលដោយប្រើ pectinase អាចធ្វើឱ្យទឹកផ្លែឈើថ្លាក្នុងរយៈពេល 1-2 ម៉ោង ខណៈពេលដែលការព្យាបាលដោយប្រើ laccase ជាធម្មតាត្រូវការពេលវេលាប្រតិកម្មយូរជាងនេះ (3-6 ម៉ោង) ដើម្បីកាត់បន្ថយសមាសធាតុ phenolic ទាំងស្រុង។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ដំណើរការនេះអាចត្រូវបានធ្វើឱ្យប្រសើរដោយការធ្វើឱ្យអង់ស៊ីមមិនដំណើរការ ឬដោយការផ្សំ laccase ជាមួយនឹងវិធីសាស្ត្រធ្វើឱ្យច្បាស់លាស់ដោយមេកានិច។⁶⁰នៅក្នុងការសិក្សានេះ ការវិភាគទម្រង់អង់ស៊ីមនៃសារធាតុចម្រាញ់ឆៅបានបង្ហាញពីសកម្មភាពសំខាន់ៗរបស់ឡាក់កាស និងអាល់ហ្វា-អាមីឡាស ខណៈពេលដែលសកម្មភាពរបស់ប៉ិចទីនណាស និងស៊ីឡាណាសមានកម្រិតទាបខ្លាំង ហើយសកម្មភាពសែលុយឡូសមិនត្រូវបានរកឃើញទេ។ ដូច្នេះ ការថយចុះនៃភាពច្របូកច្របល់ និងមាតិកាហ្វេណុលភាគច្រើនគឺដោយសារតែសកម្មភាពរបស់ឡាក់កាស ខណៈពេលដែលការផ្លាស់ប្តូរភាពស្អិតអាចបណ្តាលមកពីសកម្មភាពរបស់អាមីឡាសមួយផ្នែក។
តារាងទី 1 បង្ហាញពីប៉ារ៉ាម៉ែត្ររូបវិទ្យា-គីមីនៃទឹកផ្លែប៉ោមដែលទើបច្របាច់ថ្មីៗ និងសំណាកដែលបានព្យាបាលដោយឡាក់កាស។ លទ្ធផលបានបង្ហាញថា ទិន្នផលនៃទឹកផ្លែប៉ោមដែលទើបច្របាច់ថ្មីៗ (71.59%) គឺទាបជាងទិន្នផលនៃសំណាកដែលបានព្យាបាលដោយឡាក់កាស (87.34%)។ លទ្ធផលទាំងនេះស្របនឹងការរកឃើញរបស់ Pilnik និង Orange។⁶¹ដែលបានបង្ហាញថាការប្រើប្រាស់អង់ស៊ីមក្នុងការកែច្នៃផ្លែឈើអាចបង្កើនទិន្នផលទឹកផ្លែឈើ ធ្វើអោយប្រសើរឡើងនូវការច្រោះ និងទទួលបានទឹកផ្លែឈើដែលមានគុណភាពខ្ពស់ និងថ្លាសម្រាប់កំហាប់។ ការកើនឡើងនៃទិន្នផលទឹកផ្លែឈើភាគច្រើនដោយសារតែការកើនឡើងនៃមាតិកាស្កររលាយក្នុងទឹកផ្លែឈើ។ ក្នុងអំឡុងពេលនៃការរំលាយដោយអង់ស៊ីមនៃផ្លែឈើ មេសូគ្លីអា និង ប៉ិចទីន នៅក្នុងជញ្ជាំងកោសិកានៃផលិតផលត្រូវបានបំផ្លាញ និងបំប្លែងទៅជាសារធាតុរលាយដូចជាស្ករអព្យាក្រឹត និងអាស៊ីត។^៦២។តម្លៃ pH នៃទឹកផ្លែប៉ោមដែលបានព្យាបាលដោយអង់ស៊ីមគឺទាបជាងតម្លៃ pH នៃក្រុមត្រួតពិនិត្យយ៉ាងខ្លាំង (P < 0.05) ហើយតម្លៃ pH នៃក្រុមទាំងពីរបានកើនឡើងគួរឱ្យកត់សម្គាល់ក្នុងអំឡុងពេលផ្ទុក (តារាងទី 1)។ លទ្ធផលទាំងនេះស្របនឹងលទ្ធផលរបស់ Mark et al។⁶³ដែលបានកត់សម្គាល់ថា pH នៃទឹកផ្លែស្វាយចន្ទីបានថយចុះបន្ទាប់ពីការរក្សាទុកបន្ទាប់ពីការព្យាបាលដោយកំដៅ។ ការរិចរិលនៃសារធាតុ pectin និងការបង្កើតអាស៊ីត galacturonic បន្ទាប់ពីការព្យាបាលដោយអង់ស៊ីមអាចទទួលខុសត្រូវចំពោះការកើនឡើងនៃ pH ក្នុងអំឡុងពេលរក្សាទុក។ pH នៃសំណាកដែលបានព្យាបាលដោយអង់ស៊ីមនៅតែមានចន្លោះពី 4.05 ទៅ 4.31 ពេញមួយការផ្ទុក ខណៈពេលដែល pH នៃទឹកផ្លែប៉ោមដែលមិនបានព្យាបាលមានចន្លោះពី 4.12 ទៅ 4.33។
ជាតិអាស៊ីតសរុប (TA) នៃសំណាកដែលមិនបានព្យាបាល និងសំណាកដែលព្យាបាលដោយឡាក់កាសបានបង្ហាញពីនិន្នាការថយចុះជាមួយនឹងការកើនឡើងនៃពេលវេលាផ្ទុក (តារាងទី 1)។ ការថយចុះជាតិអាស៊ីតត្រូវបានសន្មតថាជាការបំប្លែងអាស៊ីតសរីរាង្គទៅជាកាបូអ៊ីដ្រាត ឬប្រតិកម្មអង់ស៊ីម ក៏ដូចជាអុកស៊ីតកម្មក្នុងអំឡុងពេលផ្ទុកទឹកផ្លែឈើ។⁶⁴ជាតិអាស៊ីតសរុបនៃទឹកផ្លែប៉ោមត្រួតពិនិត្យ និងសំណាកដែលបានព្យាបាលដោយអង់ស៊ីមគឺទាបជាងទឹកផ្លែឈើដទៃទៀត (ទឹកស្ត្របឺរី 0.9% ទឹកផ្លែព្រូន 2.2% ទឹកផ្លែគុមខ្វាត 1.0% ទឹកផ្លែអាព្រីខូត 2.4% ទឹកក្រូច 0.8%) ប៉ុន្តែស្រដៀងគ្នាទៅនឹងទឹកផ្លែឈើដទៃទៀត (ឧទាហរណ៍ ទឹកផ្លែពែរ 0.3%)។⁶²ភាពខុសគ្នាទាំងនេះនៅក្នុងទឹកផ្លែប៉ោមដែលច្របាច់ថ្មីៗមិនទាន់កែច្នៃ អាចបណ្តាលមកពីកត្តាផ្សេងៗដូចជា លក្ខខណ្ឌលូតលាស់ កត្តាហ្សែន កម្រិតនៃភាពចាស់ទុំ និងវិធីសាស្ត្រកែច្នៃ។⁶⁵ការថយចុះជាតិអាស៊ីតសរុបនៃទឹកផ្លែប៉ោមដែលព្យាបាលដោយឡាក់កាស និងការគ្រប់គ្រង គឺស្របនឹងលទ្ធផលដែលបង្ហាញដោយ Singh et al។⁶⁶ទាក់ទងនឹងការថយចុះជាតិអាស៊ីតសរុបនៃទឹកផ្លែប៉ោម Jin Nuo បន្ទាប់ពីរក្សាទុកបាន 74 ថ្ងៃ។ ម្យ៉ាងវិញទៀត Oshmiansky និង Wojdylo⁶⁷មិនបានរកឃើញការផ្លាស់ប្តូរគួរឱ្យកត់សម្គាល់ណាមួយនៅក្នុងជាតិអាស៊ីតនៃទឹកផ្លែប៉ោមនៅពេលសិក្សាពីឥទ្ធិពលនៃវិធីសាស្ត្រធ្វើឱ្យច្បាស់បែបប្រពៃណី។
លទ្ធផលដែលបង្ហាញក្នុងតារាងទី 1 បង្ហាញថាតម្លៃសារធាតុរឹងរលាយសរុប (TSS) នៃទឹកផ្លែប៉ោមដែលបានព្យាបាលដោយឡាក់កាសគឺខ្ពស់ជាងតម្លៃនៃសំណាកដែលមិនបានព្យាបាល។ លទ្ធផលទាំងនេះស្របនឹងការសិក្សាដែលបានបោះពុម្ពផ្សាយ។^៦៨លើសពីនេះ តារាងទី 1 បង្ហាញថា តម្លៃ TSS នៃក្រុមទឹកផ្លែប៉ោមត្រួតពិនិត្យគឺ 9.58 នៅចំណុចពេលវេលាដំបូង ហើយឈានដល់ 11.05 នៅចុងបញ្ចប់នៃរយៈពេលផ្ទុក។ តម្លៃទាំងនេះទាបជាងតម្លៃ TSS នៃទឹកផ្លែប៉ោមស្រស់ដែលរាយការណ៍ដោយ Hamid et al។^៦៩(១១.២ និង ១១.៨០ រៀងគ្នា)។ តម្លៃ TSS នៃសំណាកទឹកផ្លែប៉ោមដែលបានព្យាបាលដោយឡាក់កាសបានកើនឡើងគួរឱ្យកត់សម្គាល់ ដោយចាប់ផ្តើមពី ១១.២៣ និងឡើងដល់ ១២.៩៣ បន្ទាប់ពីរក្សាទុករយៈពេលពីរសប្តាហ៍នៅសីតុណ្ហភាព ៤អង្សាសេ (តារាងទី ១)។ ការកើនឡើងស្រដៀងគ្នានៃ TSS ក្នុងអំឡុងពេលរក្សាទុកក៏ត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅក្នុងផ្លែក្រូចឆ្មារ ក្រូចឆ្មារ និងក្រូចផ្អែមផងដែរ។ ការកើនឡើងនៃសារធាតុរឹងរលាយសរុប (TSS) ក្នុងអំឡុងពេលរក្សាទុកអាចបណ្តាលមកពីការ hydrolysis នៃ polysaccharides (ម្សៅ) ទៅជា monosaccharides (ស្ករ) ការកើនឡើងនៃកំហាប់ដោយសារតែការខ្សោះជាតិទឹកនៃទឹក និងការរិចរិលនៃ pectin នៅក្នុងទឹកទៅជាសារធាតុរឹងរលាយ។ ការកើនឡើងនៃសារធាតុរឹងរលាយសរុប (TSS) ទំនងជាដោយសារតែការកើនឡើងនៃជាតិស្កររលាយ ដែលអាចត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយការបំប្លែង pectin ឬ cellulose ទៅជាជាតិស្កររលាយដោយ pectin ឬ cellulase រៀងៗខ្លួន ឬដោយការ hydrolysis នៃម្សៅទៅជាជាតិស្ករ ដូចដែលបានរាយការណ៍ដោយ Hamed et al។^៦៩។ឥទ្ធិពលនៃឡាក់កាសលើលក្ខណៈសម្បត្តិនៃទឹកផ្លែប៉ោមអាចត្រូវបានគេសង្កេតឃើញដោយមើលឃើញ ដោយសារទឹកផ្លែប៉ោមដែលបានព្យាបាលដោយឡាក់កាសបង្ហាញពីលំហូរបានល្អជាង និងមានជាតិស្អិតទាបជាងទឹកផ្លែឈើដែលមិនបានព្យាបាល។ ការសង្កេតនេះត្រូវបានកត់ត្រានៅក្នុងតារាងទី 1; ជាតិស្អិតនៃសំណាកដែលបានព្យាបាលដោយអង់ស៊ីមគឺ 1.87 cP ខណៈពេលដែលជាតិស្អិតនៃសំណាកត្រួតពិនិត្យគឺ 2.95 cP។ ការថយចុះគួរឱ្យកត់សម្គាល់នៃជាតិស្អិតនេះទំនងជាដោយសារតែសមត្ថភាពកាន់ទឹកខ្ពស់នៃសារធាតុដូច pectin និងការបង្កើតរចនាសម្ព័ន្ធបណ្តាញស្អិតរមួត។
នៅក្នុងការសិក្សានេះ ឥទ្ធិពលនៃឡាក់កាសទៅលើសន្ទស្សន៍ពណ៌ត្នោត (BI) នៃទឹកផ្លែប៉ោមត្រូវបានស៊ើបអង្កេតដោយវាស់ស្ទង់ការស្រូបយកនៅ 420 nm ដោយប្រើម៉ាស៊ីនវិភាគពន្លឺ។ លទ្ធផលត្រូវបានបង្ហាញក្នុងតារាងទី 1។ ក្នុងអំឡុងពេលរក្សាទុក BI នៃសំណាកទឹកផ្លែប៉ោមទាំងនៅក្នុងក្រុមដែលបានព្យាបាល និងមិនបានព្យាបាលបានបង្ហាញពីនិន្នាការកើនឡើងបន្តិចម្តងៗ។ BI ឆ្លុះបញ្ចាំងពីកម្រិតនៃការពណ៌ត្នោត ហើយអាចបម្រើជា^{សំខាន់មួយ}សូចនាករនៃប្រតិកម្មពណ៌ត្នោតដោយអង់ស៊ីម និងមិនមែនអង់ស៊ីម។ ការស្រូបយកបានកើនឡើងគួរឱ្យកត់សម្គាល់ក្នុងអំឡុងពេលផ្ទុក (P < 0.05)។ នៅចុងបញ្ចប់នៃការផ្ទុក_A420តម្លៃនៃសំណាកទឹកផ្លែប៉ោមនៅក្នុងក្រុមត្រួតពិនិត្យ និងក្រុមដែលបានព្យាបាលដោយអង់ស៊ីមបានកើនឡើងប្រហែល 217% និង 121% រៀងគ្នា (តារាងទី 1)។ លទ្ធផលបង្ហាញថា ការព្យាបាលដោយអង់ស៊ីមអាចកាត់បន្ថយកម្រិតពណ៌ត្នោតបានប្រហែល 56%។ លទ្ធផលរបស់ Bezerra et al.^[១៩]] ស្របនឹងលទ្ធផលរបស់យើង។ ពួកគេបានប្រើជាតិសរសៃ laccase-glutaraldehyde-ដូង ដើម្បីធ្វើឱ្យទឹកផ្លែប៉ោមមានភាពច្បាស់លាស់ ដោយកាត់បន្ថយពណ៌ដើមរបស់វាចំនួន 61%។
ទោះបីជាសារធាតុ polyphenols នៅក្នុងទឹកផ្លែឈើមានឥទ្ធិពលវិជ្ជមានទៅលើអាហារូបត្ថម្ភ និងការព្យាបាលលើរាងកាយមនុស្សក៏ដោយ ក៏វាក៏អាចមានប្រតិកម្មជាមួយប្រូតេអ៊ីនផងដែរ ដែលបណ្តាលឱ្យទឹកផ្លែឈើមានពពក ដីល្បាប់ ឬភាពច្របូកច្របល់ ដោយហេតុនេះផ្លាស់ប្តូររសជាតិ និងក្លិនក្រអូបនៃផលិតផល និងកាត់បន្ថយអាយុកាលរបស់វា។⁷¹គោលបំណងនៃការសិក្សានេះគឺដើម្បីកាត់បន្ថយមាតិកាសមាសធាតុ phenolic នៃទឹកផ្លែប៉ោមដោយសុវត្ថិភាពដោយប្រើ laccase ពី Pleurotus ostreatus NRC 620។ លទ្ធផលដែលបង្ហាញក្នុងតារាងទី 1 បង្ហាញថាមាតិកាសមាសធាតុ phenolic សរុបនៃទឹកផ្លែប៉ោមដែលបានព្យាបាលដោយ laccase ត្រូវបានកាត់បន្ថយគួរឱ្យកត់សម្គាល់មុនពេលរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាព 4°C។ លើសពីនេះ មាតិកាសមាសធាតុ phenolic សរុបក៏បានថយចុះក្នុងអំឡុងពេលរក្សាទុកនៅក្នុងគំរូទាំងពីរដែលបានសិក្សា (តារាងទី 1)។ ការស្រាវជ្រាវដោយ Sandri et al.⁷²បានបង្ហាញថា ទឹកផ្លែប៉ោមដែលបានព្យាបាលដោយអង់ស៊ីមអាចរក្សាបាននូវសកម្មភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្ម និងមាតិកាសមាសធាតុ phenolic របស់វា។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ លទ្ធផលនៃការសិក្សាមួយដោយ Lettera et al.⁷³បង្ហាញថាការព្យាបាលទឹកក្រូចជាមួយឡាក់កាសផ្សិតអាចកាត់បន្ថយមាតិកានៃសមាសធាតុហ្វេណុលនៅក្នុងវារហូតដល់ ៤៥%។
សមាសធាតុហ្វេណុលត្រូវបានបង្ហាញថាមានលក្ខណៈសម្បត្តិដូចជាការកំចាត់រ៉ាឌីកាល់សេរី ការកាត់បន្ថយ និងការពន្លត់អុកស៊ីសែនតែមួយ ការផ្ទេរអាតូមអ៊ីដ្រូសែន និងការបរិច្ចាគអេឡិចត្រុងទៅរ៉ាឌីកាល់សេរី ដែលធ្វើឱ្យវាក្លាយជាសារធាតុប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្មដ៏មានឥទ្ធិពល។⁷⁴ដូច្នេះហើយ នៅក្នុងការសិក្សានេះ វិធីសាស្ត្រដែលមានមូលដ្ឋានលើ DPPH និង FRAP ត្រូវបានប្រើដើម្បីវាយតម្លៃឥទ្ធិពលនៃឡាក់កាសលើសកម្មភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្មនៃទឹកផ្លែប៉ោមដែលរក្សាទុកក្នុងទូទឹកកករយៈពេល 14 ថ្ងៃ (តារាងទី 2)។ វិធីសាស្ត្រទាំងពីរបានបង្ហាញពីការកើនឡើងនៃសកម្មភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្មក្នុងអំឡុងពេលផ្ទុក ដែលអាចបណ្តាលមកពីការកើនឡើងនៃសមាសធាតុហ្វេណុលសេរី ឬការបង្កើតផលិតផលប្រតិកម្ម Maillard (MRPs) ដោយផលិតផលប្រតិកម្ម Maillard ទំនងជាមូលហេតុនៃការកើនឡើងនៃសកម្មភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្ម។⁷⁵ប្រតិកម្ម​ប្រែ​ពណ៌​ត្នោត​មិនមែន​ជា​អង់ស៊ីម (រួម​ទាំង​ការ​រលួយ​អាស៊ីត ascorbic ប្រតិកម្ម Maillard និង​ការ​រលួយ​ស្ករ​ដែល​កាតាលីករ​ដោយ​អាស៊ីត) បង្កើត​សារធាតុ​ពណ៌​ត្នោត (មេឡាណូអ៊ីត)។ ផលិតផល​រលួយ​អាស៊ីត ascorbic កម្រិត​មធ្យម និង​ផលិតផល​រលួយ​ស្ករ (ដូចជា​សមាសធាតុ carbonyl) អាច​មាន​ប្រតិកម្ម​ជាមួយ​អាស៊ីត​អាមីណូ​តាមរយៈ​ប្រតិកម្ម Maillard។⁷⁶ទោះបីជាការឡើងពណ៌ត្នោតនៃផ្លែឈើ និងបន្លែក្នុងអំឡុងពេលផ្ទុកត្រូវបានសិក្សាយ៉ាងទូលំទូលាយក៏ដោយ ការយល់ដឹងរបស់យើងអំពីប្រតិកម្មទាំងនេះនៅតែមានកម្រិត។⁷⁷បើប្រៀបធៀបជាមួយវិធីសាស្ត្រ FRAP ទឹកផ្លែប៉ោមដែលបានព្យាបាលដោយឡាក់កាសបានបង្ហាញពីសកម្មភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្មទាបជាងគួរឱ្យកត់សម្គាល់ដោយវិធីសាស្ត្រ DPPH (តារាងទី 2) ហើយសកម្មភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្មនៃគំរូទាំងអស់បានកើនឡើងគួរឱ្យកត់សម្គាល់ជាមួយនឹងការកើនឡើងនៃពេលវេលាផ្ទុក។ វិធីសាស្ត្រពីរផ្សេងគ្នាសម្រាប់កំណត់សកម្មភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្មត្រូវបានប្រើប្រាស់ក្នុងការសិក្សានេះ ពីព្រោះគោលការណ៍របស់ពួកគេខុសគ្នា។ វិធីសាស្ត្រ DPPH វាស់ស្ទង់សមត្ថភាពក្នុងការបន្សាបរ៉ាឌីកាល់សេរី ខណៈពេលដែលវិធីសាស្ត្រ FRAP វាស់ស្ទង់សមត្ថភាពក្នុងការកាត់បន្ថយអ៊ីយ៉ុងជាតិដែក។ ដូច្នេះ វាត្រូវបានណែនាំឱ្យប្រើវិធីសាស្ត្រច្រើនសម្រាប់កំណត់សកម្មភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្ម ដើម្បីយល់កាន់តែច្បាស់អំពីសកម្មភាពប្រឆាំងអុកស៊ីតកម្មនៃគំរូដែលបានសិក្សា។⁷⁸
ការរកឃើញសំខាន់ៗមួយនៃការសិក្សានេះគឺថា ឡាក់កាសផ្សិត *Pleurotus ostreatus* NRC 620 បង្ហាញសកម្មភាពល្អបំផុតនៅសីតុណ្ហភាព 70°C និង pH 3.0។ បើប្រៀបធៀបជាមួយឡាក់កាសផ្សិតដទៃទៀតដែលត្រូវបានគេប្រើជាទូទៅសម្រាប់ការបន្សុទ្ធទឹកផ្លែឈើ ដូចជាឡាក់កាសផ្សិត *Trametes versicolor* និង *Ganoderma lucidum* ឡាក់កាសផ្សិត *P. ostreatus* NRC 620 បង្ហាញស្ថេរភាពកម្ដៅខ្ពស់ជាង និងមាន pH អាស៊ីតច្រើនជាង។ ឡាក់កាសពី *Trametes versicolor* និង *Ganoderma lucidum* ជាធម្មតាបង្ហាញសកម្មភាពល្អបំផុតក្នុងចន្លោះពី 50-60°C និងនៅតម្លៃ pH ចន្លោះពី 3.5 និង 5.0។ ភាពខុសគ្នានេះអាចរួមចំណែកដល់ប្រសិទ្ធភាពបន្សុទ្ធទឹកផ្លែឈើកាន់តែប្រសើរឡើង ជាពិសេសសម្រាប់ទឹកផ្លែឈើដែលមានជាតិអាស៊ីត ដែលស្ថេរភាពនៅតម្លៃ pH ទាបគឺមានសារៈសំខាន់។ លក្ខណៈពិសេសតែមួយគត់របស់ *P. បើប្រៀបធៀបទៅនឹងឡាក់កាសផ្សិតដទៃទៀតដែលបានសិក្សា ឡាក់កាសផ្សិត *Pleurotus ostreatus* NRC 620 បង្ហាញសមត្ថភាពក្នុងការដំណើរការប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាពក្រោមលក្ខខណ្ឌដែលពិបាកជាង។ សីតុណ្ហភាពសកម្មភាពល្អបំផុតខ្ពស់ជាងរបស់វាបង្ហាញពីគុណសម្បត្តិដែលអាចកើតមាននៅក្នុងកម្មវិធីឧស្សាហកម្ម ដូចជាអត្រាប្រតិកម្មលឿនជាងមុន និងការចម្លងរោគដោយមីក្រូសរីរាង្គថយចុះ។ pH ទាបរបស់វា ដែលសមស្របទៅនឹងធម្មជាតិអាស៊ីតនៃទឹកផ្លែឈើជាច្រើន អាចមានប្រយោជន៍ក្នុងដំណើរការបន្សុទ្ធទឹកផ្លែឈើ។ លទ្ធផលទាំងនេះបង្ហាញពីភាពត្រឹមត្រូវនៃការរុករកបន្ថែមទៀតសម្រាប់ការអនុវត្តទ្រង់ទ្រាយធំ ដែលធ្វើឱ្យ *Pleurotus ostreatus* NRC 620 ជាជម្រើសដ៏សមស្របមួយចំពោះប្រភពឡាក់កាសផ្សិតប្រពៃណី។ បើប្រៀបធៀបទៅនឹងការសិក្សាពីមុនៗ យើងបានរកឃើញថាសីតុណ្ហភាពល្អបំផុតគឺ 60°C និង pH ល្អបំផុតគឺ 3.0។ បន្ទាប់ពីប្រតិកម្មនៅ 60°C រយៈពេល 80 នាទី ឡាក់កាស *Ganoderma lucidum* នៅតែរក្សាបាន។⁴⁶% នៃសកម្មភាពរបស់វា។79 យោងតាម ​​Kurniawati និង Nicelle⁸⁰អង់ស៊ីម *ផ្សិតលីងជឺលីង* បង្ហាញពីស្ថេរភាពល្អឥតខ្ចោះទៅមធ្យមនៅសីតុណ្ហភាព 25°C និងតម្លៃ pH ចាប់ពី 5.0 ដល់ 8.0 និងស្ថេរភាពនៅ pH 6.0 និងសីតុណ្ហភាពចាប់ពី 10 ដល់ 30°C។ នៅក្នុងការសិក្សានេះ យើងបានរកឃើញថា pH និងសីតុណ្ហភាពល្អបំផុតសម្រាប់សកម្មភាពអង់ស៊ីមសម្រាប់ផ្សិតលីងជឺលីង *Pleurotus ostreatus* គឺ 3.0 និង 70°C រៀងៗខ្លួន។ បន្ទាប់ពីការភ្ញាស់នៅសីតុណ្ហភាព 40°C និង 50°C រយៈពេលពីរម៉ោង អង់ស៊ីមរក្សាបានសកម្មភាព 68.33% និង 59.61% រៀងៗខ្លួន។ លើសពីនេះ ឡាក់កាស Pleurotus ostreatus NRC 620 បានបង្ហាញពីសកម្មភាពខ្ពស់លើជួរសីតុណ្ហភាពធំទូលាយចាប់ពី 50°C ដល់ 80°C ដែលស្ទើរតែឈានដល់សកម្មភាពអតិបរមា (69%–98%) ដោយសកម្មភាពអតិបរមាត្រូវបានគេសង្កេតឃើញនៅសីតុណ្ហភាព 70°C។
សរុបមក ឡាក់កាសផ្សិតអយស្ទ័រ NRC620 ដែលទទួលបានក្រោមលក្ខខណ្ឌឋិតិវន្ត បានបង្ហាញពីសកម្មភាព និងស្ថេរភាពល្អបំផុតនៅទូទាំងជួរនៃ pH និងលក្ខខណ្ឌសីតុណ្ហភាព ដែលបង្ហាញពីស្ថេរភាពខ្ពស់ជាងបើប្រៀបធៀបទៅនឹងប្រភពអង់ស៊ីមផ្សេងទៀត។ ការបន្ថែម 10 mM MgSO₄ និង CuSO₄ បានបង្កើនសកម្មភាពអង់ស៊ីមប្រហែល 21% និង 35% រៀងគ្នា។ នៅពេលកែច្នៃទៅជាទឹកផ្លែប៉ោម អង់ស៊ីមបានកាត់បន្ថយ pH និងភាពស្អិត ខណៈពេលដែលមាតិកា phenolic បានថយចុះបន្តិចបន្តួចក្នុងអំឡុងពេលផ្ទុក។
លទ្ធផលទាំងនេះបញ្ជាក់ពីសក្តានុពលរបស់ឡាក់កាសនៅក្នុងឧស្សាហកម្មម្ហូបអាហារ ជាពិសេសនៅក្នុងការធ្វើឱ្យភេសជ្ជៈមានភាពថ្លា។ តាមរយៈការបំបែកសមាសធាតុហ្វេណុលជាពិសេស ឡាក់កាសមិនត្រឹមតែកាត់បន្ថយភាពច្របូកច្របល់ និងបង្កើនភាពថ្លាប៉ុណ្ណោះទេ ប៉ុន្តែវាថែមទាំងរក្សាគុណភាពនៃទឹកផ្លែឈើក្រោមលក្ខខណ្ឌប្រតិបត្តិការស្រាលផងដែរ។ មិនដូចសារធាតុធ្វើឱ្យថ្លាបែបប្រពៃណីដូចជា ជែលឡាទីន ប៊ែនតូនីត និងស៊ីលីកាជែល ឡាក់កាសមិនបង្កើតកាកសំណល់ ឬយកក្លិនក្រអូបចេញពីភេសជ្ជៈនោះទេ ដែលធ្វើឱ្យវាក្លាយជាជម្រើសដែលមិនប៉ះពាល់ដល់បរិស្ថាន និងមាននិរន្តរភាពជាង។ លើសពីនេះ បើប្រៀបធៀបទៅនឹងអង់ស៊ីម និងវិធីសាស្ត្រច្រោះផ្សេងទៀត ឡាក់កាសផ្តល់នូវដំណោះស្រាយដែលមានគោលដៅ និងសន្សំសំចៃដោយមិនធ្វើឱ្យខូចគុណភាពផលិតផល។
Kyomuhimbo, HD និង Brink, HG។ ការអនុវត្ត និងយុទ្ធសាស្ត្រធ្វើឱ្យអសកម្មនៃឡាក់កាសដែលមានផ្ទុកទង់ដែង; ការពិនិត្យឡើងវិញ។ Heliyon 9, e13156 (2023)។